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家庭组织培养建议-园艺栽培

家庭组织培养建议

    1.培养容器和玻璃仪器的准备:     进行培养基的配制首先要准备好培养瓶和配制使用的玻璃仪器。培养瓶一般使用各种果酱瓶,要先用洗洁精浸泡瓶子4~8小时,再用流水冲洗数次。其他的玻璃仪器同样需要这样清洁,直到玻璃壁上不挂水珠而是成为水膜为止。清洗完毕的玻璃容器要倒扣,空去瓶内的水。     清洗干净的容器要注意防尘,尽量放置在玻璃柜中。更简单的是用干净的毛巾将容器盖住。     移液管要用吸球来清洗,反复用蒸馏水吹吸直到洁净为止,将移液管放置在一个长筒中,便于使用。一般移液管只能使用一次,即要清洗,所以有多必要准备几只移液管,建议:10ml/2支,5ml/2支,1ml/5支。     2.培养基的配制:     经典的组织培养用培养基是ms配方,其基本上划分为:大量元素、微量元素、铁盐、有机复合物、植物激素、糖和支持物。这些成分的用量都在癫痫病治疗比较新方法毫克级,用普通天平是难以称量的,为了解决这个问题,我们可以按比例放大各成分的用量配制成母液,使用的时候按一定比例加入即可。     下面将一种ms培养基的母液配制方案公布如下:     大量元素:硝酸铵66.0克;     硝酸钾76.0克;     无水氯化钙13.3克;     七水硫酸镁14.8克;     磷酸二氢钾6.8克。     以上分别溶解后合并定容到1升,每配制1升标准ms培养基取25毫升。     铁盐:七水硫酸亚铁5.56克;     乙二胺四乙酸二钠(edtana)7.46克。     以上两种分别加热溶解,混合,定容到1升,调整ph到5.5以下,每配制一升ms取5毫升。     微量元素和有机复合物的用量过于微小,为了简便我们可以用蔬菜提取液或者马铃薯提取液代替。通常我们习惯用100克菠菜加100ml的水煮沸10分钟儿童癫痫病病人的日常保健方式有哪些,过滤留滤液,每配制1升ms培养基加入20~50毫升提取液。同样也可以使用带皮马铃薯100克加200毫升水煮沸15分钟,过滤留滤液,每升ms加入50~100毫升即可。     加入上述各组分后,每升ms培养基还需要加入白砂糖30克,琼脂7克。     这里要说明的是,糖和琼脂都是可变的量,要根据需要调整。另外制作果冻用的卡拉胶也可以代替琼脂,透明度更好。     上述各成分加入后,定容到800毫升左右,用微波炉加热,直到琼脂全部溶解为止。此时加入所需的植物激素(通常配制成0.1%溶液,这样每取1毫升,换算到培养基中就是1ppm)。然后加水定容到1100毫升(1.1升),之所以多出0.1升是为了抵消分装和消毒中的损耗。最后用酸碱调整ph到5.8~6.0。     3.使用ms原粉配制培养基:     目前国内的一些化学品公司开发了简便的ms培养基原粉,大大简便了培养基的配制,根据不同公司的说明选择培养基的种类。下面就以ms原粉为例:ms培养基原粉,包括了大量元素、微量元素、铁盐、有机复合物、糖和琼脂,一般按使用方法称量,微波炉加热溶解,加入激素,定容到1100毫升(1.1升),调榆林治疗癫痫病那里最好整ph值到5.8~6.0。     4.分装:     将配制好的培养基分装在培养容器中,注意要趁热分装,因为琼脂在40度以下就会凝固。每个培养瓶装培养基大约是瓶容积的1/6~1/5,注意不要将培养基挂在瓶的外壁,这样容易造成污染。分装后用聚丙烯薄膜或着方便面的袋子封口,用胶圈固定(胶圈尽量选择自行车的内胎,这种胶圈比较耐热)。     5.灭菌:     采用家庭压力锅消毒,建议到医疗器械用品商店买一些“灭菌效果试纸”,它们可以指示灭菌效果,当灭菌达到效果时会变色。把试纸和培养基同时放入锅内,加热到有大量蒸汽冒出,再加上压力伐,维持小火30~40分钟。     灭菌完毕后自然冷却,将培养基取出,放在阴凉无尘处备用。     6.接种箱的准备:     新制作的接种箱必须要清洁干净,尽量做到无死角。每次使用前2小时,将操作所需要的全部物品放入接种箱,再用一个小烧杯加入3~5克高锰酸钾放入接种箱内,在箱内向烧杯中倒入2~3毫升的甲醛溶液,大约几秒钟后会看到甲醛蒸汽出现,这样可以对接种箱内的所有物品进行阜阳癫痫病如何才能治疗初次消毒;同时打开紫外线灯照射。紫外线灯是高电压穿激汞蒸汽产生的,紫外线进行第二道灭菌,在紫外线照射大约15分钟后,会激发氧气形成臭氧,臭氧作为第三道灭菌防线,这样经过三次灭菌,接种箱基本上可以达到无菌标准。     在操作前15分钟内,向刚才蒸发甲醛用的烧杯中倒入5毫升浓氨水,因为甲醛对人体有毒害作用,氨水可以和甲醛形成一种叫做“六亚甲基四胺”的固体物质,从而中和了甲醛的刺激性蒸汽。这个时候紫外灯不要关掉,要继续照射,直到操作前5分钟关闭,维持黑暗5分钟,然后再打开日光灯进行操作。维持5分钟黑暗的原因是,紫外光对微生物的杀灭是作用于dna的胸腺嘧啶,形成四聚体,但是微生物具有一种光复活蛋白,可以在有可见光的环境下还原胸腺四聚体,而使微生物复活,这个作用叫做“光复活作用”,所以在关掉紫外灯后必须维持黑暗几分钟,避免光复活作用的出现。

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